Высокотоксичное вещество альфа-Аманитин

альфа-Аманитин.

альфа-Аманитин Циклопептид. Выделен из бледной поганки Летерьером в 1826 году, а в 1893 г. французский врач Сиберт впервые описал фаллоидиновый синдром, как связанный с воздействием аманитина. Бледная поганка входит в род мухомор (аманита) семейства мухоморовых (аманитовых) порядка пластинчатых, растет в лиственных и хвойных лесах, на опушках, просеках одиночно и группами с июня до осени. Эти грибы, содержат в каждом грамме сырых грибов – 0,08 мг альфа-аманитина и 0,05 мг бета-аманитина, всего 0,13 мг. Есть малоизвестный факт, что аманитины содержатся во всех видах грибов, в том числе и в съедобных. Смесь аманитинов – бесцветное кристаллическое вещество с температурой плавления 245 С. Смертельная доза альфа-аманитина для человека составляет 5-8 мг (перорально). Растворим в воде, метаноле, этаноле. Токсичен при попадании в рот, на кожу, ингаляционно. Симптомы отравления появляются после латентного периода в несколько часов. Отравление начинается с рвоты, поноса, болей в животе, учащения дыхания и потери сознания. Смерть наступает только через 2-3 суток в результате тяжелого поражения печени, сердца и сосудистого центра. ЛД50 (мыши, п/о) = 1 мг/кг. Устойчив к нагреванию и гидролизу.Специфический ингибитор РНК-полимеразы II (РНК- полимераза II транскрибирует гены, РНК-продукты которых будут транслированы в белки).

01

Наиболее тяжелые отравления грибами наблюдаются при употреблении в пищу бледной поганки и сопровождаются развитием фаллоидинового синдрома (гастроэнтерит, печёночно-почечная недостаточность). Продолжительность латентной фазы при этом, как правило, более 6 часов (8-21 час). Вторая фаза отравления (острого гастроэнтерита) обычно начинается внезапно обильной рвотой. Тошнота присоединяется позже, в рвотных массах появляется примесь желчи. Неукротимая рвота может продолжаться 2-4 сут. Стул обильный, микозный и безфекальный, часто с примесью крови, с частотой до 20-25 раз в сутки. Температура тела – в пределах нормальных значений. Желудочно-кишечный синдром в 70% случаев сопровождается изжогой, тенезмами и коликообразными болями в животе. В тяжелых случаях этот синдром продолжается от 3 до 6 дней. Нарастает клиническая картина клеточной и внеклеточной дегидратации: постоянная жажда и слабость, астения и адинамия, судорожные сокращения икроножных мышц, тахикардия и артериальная гипотония. При лабораторно-функциональном исследовании выявляется трудно компенсируемый метаболический ацидоз, связанный с массивным разрушением цитоплазматических мембан гепатоцитов, блоком процессов окислительного фосфорилирования. Развивается выраженная гиповолемия и гемоконцентрация (гематокрит часто превышает 0,5-0,6). Наблюдаются тяжёлые электролитные нарушения – гипонатриемия и гипохлоремия (до 60 % от нормы). Вследствие развития декомпенсированного ацидоза и выраженного цитолиза часто наблюдается гипокалиемия. Необходимо подчеркнуть, что развивающаяся в ряде случаев острая почечная недостаточность (олигурия, повышение содержания мочевины и креатинина в плазме крови) носит вторичный, функциональный характер. При недостаточной коррекции водно-электролитных расстройств наблюдается заметное падение массы тела больного, появляются резкая сухость и складчатость кожи, снижение внутриглазного давления. Если в этот период пострадавший не умирает, то болезнь переходит в последнюю фазу или фазу висцеральных поражений (соматогенная стадия). На ферментативном уровне первые признаки цитолитического синдрома можно зарегистрировать на 1-2 день отравления. Они проявляются последовательным повышением активности АсАТ и АлАТ. Субэктеричность склер обнаруживается при превышении концентрации билирубина 30 мг/л. Содержание билирубина в плазме крови редко превышает 80 мг/л и желтушность кожных покровов является непостоянным симптомом. Нарастают признаки эндотоксикоза, нарушения КЩС. Вследствие специфического нарушения выработки основных факторов коагуляции печенью развивается ДВС-синдром. В терминальной фазе отравления больные, как правило, находятся в глубокой коме, с выраженной одышкой и гипертермией, желтухой и диффузными проявлениями геморрагического диатеза, декомпенсированным кровообращением, олиго-анурией.

Интенсивная терапия при острых отравлениях бледной поганкой должна включать следующие основные компоненты:
Промывание желудка, гастроинтестинальную энтеросорбцию (активированный уголь по 30 мл 4 раза в сут., энтеросорб, энтеродез по 10 г 3 раза в сут.). При выраженных позывах к рвоте необходимо назначение больным аэвита.
Для коррекции водно-электролитных нарушений (выраженная гемоконцентрация и гиповолемия, гипонатриемия) и КЩС (метаболический ацидоз) необходимо предусмотреть внутривенное введение физиологического раствора, электролитных смесей, 5-10 % раствор глюкозы, реомакродекса, полиглюкина (под контролем клинических и лабораторных показателей). Общий объем вводимых инфузионных сред может при этом достигать 4-6 л. Поскольку основной токсический компонент при отравлениях с развитием фаллоидинового синдрома (аманитин) является водорастворимым ядом, в целях детоксикации на ранних этапах оказания помощи, возможно применение метода форсированного диуреза. Учитывая динамику концентрации яда в крови (двугорбая кривая), его рекомендуется применять длительно – не только в первые сутки отравления, но и на 2-4 сут. Основным условием применения форсированного диуреза является предварительная коррекция ОЦК. Для стимуляции диуреза при уровне гематокрита 0,35-0,45 необходимо вводить салуретики (лазикс 0,6-1,8 мг/кг).
С целью нормализации кровообращения на уровне микроциркуляторного русла вводят реополиглюкин (400 мл) с дезагрегантами (трентал 5,0 мл, курантил 2,0 мл) и прямыми антикоагулянтами (гепарин 60-80 ед/кг) под контролем коагулограммы. Прямые антикоагулянты необходимо применять только после коррекции ОЦК, устранения гемоконцентрации и создания умеренной гемодиллюции.
При поражении кишечника для снижения бактериальной интоксикации проводят антибиотикотерапию (левомицетин по 0,5 г 4 раза, неомицин по 1,0 г 4 раза, панфурекс по 1 капсуле 4 раза, эрцефурил по 1 капсуле 4 раза per os).
Нарушение белкового обмена, гипопротеинемия и аминокислотный дисбаланс требует внутривенного введения белковых препаратов (альбумин, свежезамороженная плазма), аминокислотных смесей (левамин, альвезин и др.).
При выраженной гиперкоагуляции необходимо, прежде всего, устранить волемические нарушения (гиповолемия и гемоконцентрация). После этого, в случае необходимости, ввести гепарин 60-160 ед/кг (2-4 /сут), трентал, перелить растворы с дезагрегантной активностью (реополиглюкин, гемодез). Больным с гипокоагуляционным синдромом внутривенно вводят 10 % раствор хлорида кальция (10-20 мл), децинон, свежую донорскую кровь (100-150 мл), фибриноген, свежезамороженную донорскую плазму.
Защитная печеночная терапия включает ежедневное введение витаминов группы В: В1 5 % – 1,0 мл 2 /с, В6 5 % -1,0 мл 2 /с, В12 – 200 мкг 2 /с, аскорбиновую кислоту (до 1000 мг/сут), эссенциале в/в 10 мл 2 раза или перорально 2 капсулы 3 /сут. С целью регуляции липидного и углеводного обмена необходимо введение липоевой кислоты (0,5 % раствор 5,0-8,0 мл или по 2 капсулы 4 раза), легалона. Выраженными гепатопротекторными свойствами обладают раствор глюкозы при их внутривенном введении (10% – 5,0 мл/кг), раствор альбумина (5-10%).
С целью коррекции гормональных нарушений применяют глюкокортикоиды (преднизолон 20-30 мг/кг*сут, гидрокортизон 40-70 мг/кг*сут). Продолжительность гормонотерапии должна составлять не менее 7 сут.
С целью повышения антиоксидантной защиты и снижения активности перекисного окисления липидов необходимо введение антиоксидантов (токоферола ацетат 2,0 мл 4 раза в/в или 2 капсулы 4 раза перорально, витамин С до 1,0 г в/в). Проведение ГБО возможно лишь в периоде реконвалесценции.
Основой лечения и профилактики гепато- и нефропатий является комплексное применение методов консервативной терапии и активной хирургической детоксикации. Гемосорбция может проводиться лишь в ранние сроки с момента отравления – в первые сутки (токсикогенная фаза). При незначительно выраженных признаках гепатопатии показаниями к её проведению служат семейные случаи отравлений. В дальнейшем, при выраженной картине поражения печени, проводят ежедневные сеансы обменного плазмафереза (ПФ) с замещением плазмы не менее 1000-1500 мл. С успехом применяется методика гемодиализа, фильтрационные методы активной детоксикации (гемофильтрация, гемодиафильтрация). Основным показанием к проведению гемодиализа служит азотемия (креатинин выше 0,5 ммоль/л), гиперкалиемия (более 6 ммоль/л), гипергидратация. Из приведённых выше методов наиболее эффективным является гемодиафильтрация. При этом, эффект диализа низкомолекулярных соединений усиливается их дополнительной фильтрацией через полупроницаемую мембрану гемофильтра, существенно возрастает элиминация молекул средней массы за счет их конвекционного переноса и снижается выраженность эндотоксикоза.
Важно подчеркнуть, что наилучший прогноз и результаты лечения больных с отравлениями бледной поганкой достигаются лишь при максимально раннем оказании помощи (начало интенсивной терапии и активной хирургической детоксикации в течение первых суток с момента отравления).

Источники информации:

http://obi.img.ras.ru/humbio/Transcription/000038e1.htm

http://sndesign.narod.ru/demo/blood/gemopage.htm

http://rol.ru/news/med/news/00/10/24_827.htm

Свойства вещества:
α-аманитин
01
α-аманитин
skc-файл
Синонимы и иностранные названия:
α-amanitin (англ.)
Внешний вид:
игольчатые кристаллы
Брутто-формула (система Хилла):
C39H54N10O14S
CAS №: 23109-05-9
Молекулярная масса (в а.е.м.): 918,97
Температура плавления (в °C):
254-255
Температура разложения (в °C):
255
Растворимость (в г/100 г растворителя или характеристика):
вода: растворим
метанол: растворим
этанол: растворим
Способы получения:

Выделяют из бледной поганки экстракцией спиртом с последующим разделением на хроматограмме.

Природные и антропогенные источники:1

[Разновидности бледной поганки] Содержится в различных видах грибов рода Amanita. Наибольшее содержание (0,2-0,4 мг/г) обнаруживается в бледной поганке Amanita phalloides и ее белой разновидности Amanita virosa. Кроме того обнаруживается в грибах родов Galerina и некоторых видов Leviota.

Летальная доза (ЛД50, в мг/кг):
1 (мыши, перорально)
0,1 (мыши, внутрибрюшинно)
0,1 (человек, перорально)
Механизм действия:

Угнетает эукариотическую ядерную РНК-полимеразу II, ответсвенную за образование мРНК. В результате блокируется синтез белка и происходит отсроченная (в течение 24 ч) гибель клетки. Основная мишень – клетки печени.

Распределение и трансформация в окружающей среде и живых организмах:

Около 60% всосавшегося вещества депонируется в печени и около 3% – в почках. Выводится преимущественно почками, причем его обнаружение в моче возможно только через 17-28 ч после поступления в организм. Элиминация данным путем продолжается 96 ч. Через плацентарный барьер аманитин не проникает.

Значительное количество всосавшегося аманитина экскретируется желчью с последующим включением в энтерогепатическую циркуляцию, продолжающуюся 48 ч.

Симптомы острого отравления:

Токсичен при попадании в рот, на кожу или при вдыхании. Имеет большой латентный период (6 ч и более).

Аналитические свойства вещества:

Для теста на аманитины используют их реакцию с коричным альдегидом содержащимся в газетной бумаге. Реакция с грибом проводится так: свежеотрезанный кусочек гриба прикладывают к газетной бумаге для того, чтоб осталось отчетливое влажное пятно; бумагу высушивают на воздухе и смачивают 8 н. соляной кислотой – появляющееся в течение 15 мин синее пятно указыает на присутствие аманитинов.

Дополнительная информация:

Не разрушается при термической обработке и длительном хранении содержащих аманитин грибов.

Источники информации:

“The Merck Index” 11th ed., Merck & Company, 1989. – С. 60
“Неотложная помощь при острых отравлениях: Справочник по токсикологии”. – Под ред. Голикова С.Н. – М.: Медицина, 1977. – С. 231
“Токсикологическая химия”. – Под ред. Плетеневой Т.В. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. – С. 433-437
“Химическая энциклопедия”. – Т.5. – М.: Советская энциклопедия, 1999. – С. 529
Lewis R.J. “Sax’s Dangerous Properties of Industrial Materials”. – 11ed. – Wiley-interscience, 2004. – С. 139
Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. “Справочник биохимика”. – М.: Мир, 1991. – С. 211
Токсикологический вестник. – 1994. – №5. – С. 13-22
Якубке Х.-Д., Ешкайт Х. “Аминокислоты, пептиды, белки”. – М.: Мир, 1985. – С. 311-312